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    其中扩增dys19、dys388、dys389i、dys389ii、dys392、dys449、dys459a/b、dys485、dys504、dys531、dys626和dys627的引物不同。表52、取标准品2800m，用超纯水稀释，河南多组学迈杰转化医学NGS平台创新服务，获得浓度为1ng/μl的标准品2800m水溶液。3、以标准品2800m水溶液为模板，分别采用引物混合物1和引物混合物2进行pcr扩增，得到pcr扩增产物。每条引物在反应体系的浓度均为μm。4、同实施例2步骤一中3。5、同实施例2步骤一中4。6、同实施例2步骤一中5。检测结果见表6。结果表明，实施例1制备的试剂盒中的引物被替换后，部分基因座被抑制且引物混合物1和引物混合物2的抑制情况不同。表6注：n与其后数字表示一段碱基序列，河南多组学迈杰转化医学NGS平台创新服务，其后数字表示序列的碱基数目；“-”表示未获得基因型。上述结果表明，实施例1制备的试剂盒中引物具有不可替换性，本发明的发明人经过大量实验摸索，才获得了试剂盒中的引物组合及引物浓度，河南多组学迈杰转化医学NGS平台创新服务。 迈杰转化医学有多年的药企服务经验，紧跟药物研发趋势，熟悉新药研发动向。河南多组学迈杰转化医学NGS平台创新服务

    于是，每个反应会产生许多不同长度的DN**段，并在模版的任一核苷酸位置上由其中一种双脱氧核糖核苷酸终止链的延伸。反应混合物可以通过手动灌胶或自动灌胶到用毛细管进入测序机器，再根据DNA分子大小不同用电泳分离DNA。当DNA流过凝胶后，DNA序列可以通过双脱氧核糖核苷酸上发出的荧光来进行分析。当今的Sanger测序仪使用的是毛细管自动上样的凝胶电泳，一般可以同时分析8-96个系列反应。二代测序系统在十年前就是因其可同时进行大量平行测序反应而广为人知。这些系统可以同时分析百万甚至上亿个序列反应。虽然不同的机器生产时会在技术细节上有许多不同，但他们都有以下几个共同点：1,文库建立：所有二代测序的平台都需要一个基因文库，这个基因文库包含通过引申或者连接自定义的接头序列。2,测序仪器：每个文库片段在共阶吸附的DNA连接因子的作用下，以文库适配序列为模版，在固体表面上进行扩增。这步扩增会产生许多DNA蔟，每个来源于一个文库片段，每个基因蔟都会像**的测序反应一样起作用。3,数据输出：每个仪器都会在测序结束后给出原始数据。这个原始数据时每个基因蔟中形成的DNA序列的**。 河南多组学迈杰转化医学NGS平台创新服务迈杰转化医学拥有全技术平台及丰富的伴随诊断开发经验，为药企合作伙伴提供一体化开发服务。

    包括67个y-str基因座和1个性别决定基因座amelogenin)。相比于illumina公司的forenseqtmdnasignatureprepkit，本发明提供的试剂盒中包含41个新的y-str基因座，能提供更多新的遗传信息。而且本发明提供的复合扩增体系中所有y-str基因座的**大扩增子长度都小于300bp，而forenseqtmdnasignatureprepkit中有约％(7/24)基因座的**大扩增子长度大于300bp，不利于降解检材的分析。本发明提供的试剂盒是本发明的发明人经过大量实验摸索获得的，试剂盒中的引物具有不可替换性；即引物被替换后，部分基因座将会被抑制且抑制效果不可预知。实验证明，采用本发明提供的试剂盒检测标准品2800m中68个基因座的str分型，分型结果准确。本发明具有重要的应用价值。附图说明图1为67个y-str基因座的pcr扩增产物的长度范围分布。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。标准品2800m为promega公司的产品，产品目录号为dd7251。

    连接测序法连接测序法与其他两种方法不同，因为他不用DNA聚合酶来结合核苷酸，而是用16种8-merOligo核苷酸探针，在相互连接的5端，每个探针都吸附了四种荧光染料其中的一种。每8-mer包含两个探针特异碱基，和6个退化碱基。测序反应开始时，引物先结合到适配序列上，再和相应探针结合。这个探针的结合时在退火条件下由两个探针特异碱基引导，再由DNA连接酶连接到引物序列上。未结合的oligo核苷酸被洗去后，荧光信号就开始检测会记录。在这之后，切割掉荧光信号和8-mer探针的***3个碱基，就可以开始下一个循环了。在大约7个循环的连接之后，DNA会变性，而另一个测序引物，在前一个引物的下一个碱基后开始重复这些步骤，总共用5个测序引物。这项技术的主要缺点就是产生的测序片段特别短。离子半导体测序离子半导体测序法时在测序反应种通过释放氢离子来检测一个基因蔟的序列。每个基因蔟直接定位在一个半导体三极管上，这个半导体三极管可以检测溶液的ph值。在核苷酸结合过程中，一个氢离子被释放到溶液中并会被半导体三极管检测到。这个测序反应的进行过程和焦磷酸法类似，但是花费只是他的几分之一。 迈杰转化医学设有病原体检测平台Qiastat-Dx进行呼吸道及胃肠道病原体检测。

    pcrpurificationkit为德国qiagen公司的产品，产品目录号为y5-28006。。qubittmdsdnahsassaykit为thermofisher公司的产品，货号为q32854。truseqdnapcr-freehtlibraryprepkit为illumina公司的产品，产品目录号为fc-121-3003。kapalibraryquantificationkit为kapa公司的产品，产品目录号为kk4824。miseqreagentkitv3-600cycles测序试剂为illumina公司的产品，货号为ms-102-3003。miseqfgx二代测序仪为illumina公司的产品。实施例1、基于二代测序技术检测68个基因座的试剂盒的制备一、68个基因座的筛选本发明的发明人通过查阅文献和现有二代测序str分型产品获得大量候选的y-str基因座，然后根据中国人群str群体遗传多态性分析结果，**终筛选获得68个基因座，包括67个y-str基因座和1个性别决定amelogenin基因座。 迈杰转化医学拥有丰富的伴随诊断开发经验，高质量的管理体系和高素质的研发团队。广东抗体全迈杰转化医学NGS平台创新服务

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